浅析牛ELISA试剂盒的原理和洗板时应注意的问题

　　一、牛ELISA试剂盒的原理：

　　ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

　　在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应，用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上，此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例，加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，可根据呈色的深浅进行定性或定量分析，由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。

　　二、样本储存：

　　1、收集标本前清楚要检测的成份是否足够稳定，当天进行检测的标本，储存在4℃备用。

　　2、如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存，避免反复冻融。

　　3、标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月，-70℃可保存6个月，部分激素类标本需添加抑肽酶。

　　三、洗板时应注意以下问题：

　　（1）需每天校正注液量及残液量，洗涤后残液量不得大于2μl。

　　（2）及时更换破损吸液针，避免破坏底板包被。

　　（3）针对不同厂家酶标板注意调整吸液头下降高度，避免冲洗针头卡住酶标板。

　　（4）注意调整洗液量，洗液量过多将溢出，过少将达不到洗涤效果。

　　（5）关机前使用蒸馏水冲洗管道，避免洗液的结晶物堵塞管道。

　　（6）不同种试剂盒的洗液严禁混合使用。

　　三、牛ELISA试剂盒洗板可能碰到的问题有：

　　1、采用手工洗板，孔与孔之间液体交叉。

　　2、采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。

　　3、反应板过多造成洗板等待时间长。