人纤维蛋白ELISA试剂盒的技术流程介绍

　　人纤维蛋白ELISA试剂盒技术流程：

　　1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。

　　2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

　　3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

　　4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

　　5、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

　　检测类型：酶联免疫法。

　　实验类型： 夹心法。

　　应用范围： 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体。

　　产品特点：重复性好，特异性强，性价比高，线性好。

　　检测目的：人纤维蛋白ELISA试剂盒用于测定血清，血浆及相关液体等样本，例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

　　标本的采集及保存：

　　1、血清：标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

　　2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内离心15分钟，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

　　3、组织匀浆：将动物的组织标本先用PBS洗涤，去除多余血液，匀浆化后放在20 mL PBS中于-20° C放置过夜，第二天，经过二次反复冻融破膜，将匀浆物5000x g离心5分钟，取上清即可检测。

　　4、细胞培养物上清：请离心后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。