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如何挑选大鼠ELISA试剂盒,这些方法不能错过!

发布时间: 2022-04-11  点击次数: 33次
  ELISA生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。其中大鼠ELISA试剂盒适以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
  
  市场上各种厂家、各种种属、因子,质量良莠不齐,如何慧眼识珠,选择既符合研究需求,又能挑选合适的ELISA试剂盒?
  
  1、查找待测样本的蛋白浓度
  
  可以通过NCBI的文献,给出的蛋白表达量参考值来比较大鼠ELISA试剂盒给出的样本值与报道值是否一致。
  
  2、试剂盒的应用种属、检测样本的种类
  
  除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用。
  
  3、检测范围:
  
  (1)建立线性范围:需测定9-11个浓度水平,每个浓度水平重复测定3-4次。
  
  (2)验证标称线性参数:需测定4-6个浓度水平,每个浓度水平重复测定3-4次。
  
  (3)所有样本应在一次运行中或几次间隔很短的运行中随机测定,在一天之内完成。
  
  4、大鼠ELISA试剂盒的其它指标:
  
  a、灵敏度:
  
  示例:低可检测浓度为0.1pg/ml(6次独立实验的平均值),10个零标准品浓度OD的平均值加上两倍SD,计算低可检测浓度。
  
  注意:灵敏度跟检测范围低点不相等。
  
  b、稳定性(重复性、精密性)
  
  酶标板内精密度3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次,评估酶标板内的精密度。酶标板间精密度3个已知浓度的样本酶标板间重复检测6次,评估酶标板间的精密度。
  
  试剂盒一般板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%(统计学概念)
  
  对于大鼠ELISA试剂盒来说,正确的处理样本是保证检测准确性和正确性的一步。正式实验之前使用少量的样本进行预实验,可以选择2、5、10倍稀释样本,选择合适的稀释比例进行实验,这点非常重要!

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