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猪胰蛋白酶ELISA试剂盒的原理,您知道吗?

发布时间: 2022-06-09  点击次数: 77次
  猪胰蛋白酶ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中重组猪胰蛋白酶水平。在一些疫苗和病毒载体的研发和生产过程中,贴壁细胞培养是重要的一环。
  
  从早期的原代细胞的获取到后续的贴壁细胞的传代消化,再到大规模的细胞工厂或微载体反应器培养,胰蛋白酶是一款重要的原料。
  
  但消化细胞的操作对细胞传代后的状态有很大影响,如果胰酶过量或消化时间过长,会导致细胞传代后活力减弱或直接导致细胞死亡。所以消化细胞时要严格控制胰酶使用量及消化时间,而胰酶残留的检测也是保证细胞正常生长的重要环节。
  
  由于在培养阶段使用了大量的胰蛋白酶消化,在生产的下游部分也需要进行胰酶的检测。下游的纯化以及病毒疫苗原液等对胰酶的残留检测也有很多需求。
  
  猪胰蛋白酶ELISA试剂盒是用纯化的重组猪胰蛋白酶抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入重组猪胰蛋白酶,再与HRP标记的重组猪胰蛋白酶抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
  
  TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的重组猪胰蛋白酶呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中重组猪胰蛋白酶浓度。

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