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猪ELISA试剂盒常用的灭菌操作经验分享

发布时间: 2021-11-17  点击次数: 115次
  猪ELISA试剂盒常用的灭菌操作经验的分享:
  (1)进锅不挤压:摆放待灭菌的菌种袋分层,每层菌种袋不可摆太挤,要留一定空隙,不能相互挤压,不适宜将菌种袋卧叠,要分层立放,以保证蒸汽畅流和接种穴完好。为了避免棉塞易潮湿,可在棉塞上盖一层薄膜或油纸,但覆盖物不可太大,否则会影响上下层蒸汽畅流;也可将4个菌种袋的棉塞并拢,棉塞向下一同塞到4个菌种袋的空隙中,这样塑料袋规格要加长,但防潮效果良好。
  (2)及时灭菌:随装随灭。配料到灭菌间隔时间越短越好,以免杂菌自繁,大规模生产时,要分锅灭菌。
  (3)攻头:指开始灭菌时要大火猛烧。从开始灭菌到温度达100℃,历时越短越好,不能超过2小时,以免长时间高温高湿造成杂菌自繁。当然,要做到这一点还取决于灭菌锅的保温保气性能。
  (4)控中间:指锅体下部温度达到100~C后,控制火势烧稳火,维持8~10小时。此间,温度不可回落,灭菌操作者要坚守岗位,不能因通宵灭菌、疲劳或其他原因而懈怠,引起温度回落。另外,常压灭菌为了避免烧干应注意及时向蒸发锅内补充水,但补水不能造成锅内水停止沸腾,可考虑补充沸水或微量连续补水,可见,要想节省燃料,又要做到上述这些,建造一个保温、保汽性能良好的灭菌锅十分重要。
  (5)在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性;标本放置时间过长(如一天以上),有时猪ELISA试剂盒抗原或抗体免疫活性减弱,亦可出现假阴性。为克服上述干扰,ELISA测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。

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