小鼠D-乳酸ELISA试剂盒的检测原理和操作注意事项

　　小鼠D-乳酸ELISA试剂盒酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

　　试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应，通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。

　　一、小鼠D-乳酸ELISA试剂盒检测原理：

　　本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被乳酸透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中乳酸浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中乳酸含量。

　　二、操作注意事项：

　　(1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　(2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

　　(3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

　　(4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　(5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

　　(6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。