新闻资讯 / news 您的位置:网站首页 > 新闻资讯 > ELISA试剂盒试验受影响的三大因素分析

ELISA试剂盒试验受影响的三大因素分析

发布时间: 2022-05-20  点击次数: 27次
  ELISA试剂盒,即酶联免疫法。ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,因而多年来广泛应用于各高校、医院、血站和科研机构的实验室中。
  
  ELISA实验的结果受操作影响很大,每个步骤包括加样,温育,洗涤,显色,酶标仪读数均应认真负责才能充分发挥ELISA的高灵敏,强特异的优点。我们技术人员通过几年的实验观察,认为影响ELISA实验的因素有如下三方面。
  
  1、抗原、抗体活性对效价的影响:
  
  主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活,结果不易判断。再有ELISA试剂盒灵敏度高,对杂质的反应灵敏度也高,实验中空白对照OD值偏高或假阳性;酶结合物浓度过高,也会导致OD值假性增高。试剂保存不当或活性下降;试剂盒灵敏度高。
  
  2、试验仪器:
  
  ①加样器是否经过校正,酶免测定血清用血量很少,如手工加样器的性能不好,吸取样品不,会使结果忽高忽低;
  
  ②实验器具被污染;酶标滴加在孔壁上,洗板未洗净;混用洗液或洗液稀释错误;洗液瓶中、管道或配置洗液的水中有霉菌;读数时酶标板底部有水蒸气凝结;洗液瓶、废液瓶混用;读数过程中板孔中有气泡;酶标仪偏差均可引起假阳性结果。
  
  3、操作:
  
  ①检测前先将ELISA试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用,试剂用完及时放回冰箱冷藏,以免造成试验结果假性降低;孵育温度过低;
  
  ②抗原与抗体反应达到平衡,依赖于温度与时间。温度高于45℃易引起失活及标记物脱落,温度低于4℃,影响反应速度。
  
  ③加入标本后未进行必要的混匀;标本稀释错误;加样量不正确;冷冻标本未完全溶解混匀;标本中含有防腐剂均可引起阳性对照读数不正常。
  
  总之,由于ELISA试剂盒实验的影响因素较多,在实际工作中操作规范、仔细,避免和排除各种因素的影响,使之得到准确可靠的检验结果。

联系我们

contact us

咨询电话

17317326113

扫一扫,关注我们

返回顶部