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一文弄懂,大鼠ELISA试剂盒的具体实验步骤

发布时间: 2022-07-19  点击次数: 65次
  大鼠ELISA试剂盒用于血浆和血清中有关于IgM的定量测定,免疫球蛋白M(IgM)是分子量较大的免疫球蛋白,主要由脾脏和淋巴结中浆细胞分泌合成,分为IgMl和IgM2两个亚型。
  
  大鼠ELISA试剂盒实验步骤:
  
  1、血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
  
  2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
  
  3、尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
  
  4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
  
  通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  
  5、组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
  
  6、标本采集后尽早进行提取,提取按《大鼠ELISA试剂盒相关文献》进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
  
  7、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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