一文弄懂，大鼠ELISA试剂盒的具体实验步骤

　　大鼠ELISA试剂盒用于血浆和血清中有关于IgM的定量测定，免疫球蛋白M（IgM）是分子量较大的免疫球蛋白，主要由脾脏和淋巴结中浆细胞分泌合成，分为IgMl和IgM2两个亚型。

　　

　　大鼠ELISA试剂盒实验步骤：

　　

　　1、血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　

　　2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

　　

　　3、尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

　　

　　4、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

　　

　　通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　

　　5、组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　

　　6、标本采集后尽早进行提取，提取按《大鼠ELISA试剂盒相关文献》进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

　　

　　7、不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。