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使用人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒的技巧有哪些?

发布时间: 2022-12-15  点击次数: 53次
  人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。
  
  洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中指标的浓度呈比例关系。
  
  为了保证人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒实验质量,我们需要掌握一些小技巧以助于实验的成功,那么ELISA试剂盒的操作技巧您知道吗?
  
  操作步骤:
  
  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
  
  3、样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
  
  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  
  7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

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